Для выявления антител у инфицированных ВИЧ применяют также ряд других методов: иммунофлуоресценцию, радиоиммунопреципитацию, агглютинацию.

Метод непрямой иммунофлуоресценцииотносительно прост при наличии люминесцентного микроскопа и квалифицированного персонала, способного проводить учёт результатов. В качестве антигенов в этой реакции используются различные клеточные линии, инфицированные ВИЧ (MOLT, H9, СЕМ, HUT-78 и др.).

Радиоиммунопреципитация является наиболее чувствительным методом выявления антител к ВИЧ и может использоваться как метод экспертной диагностики при неопределенных результатах ИБ. В основе метода лежит использование белков ВИЧ, меченных радиоактивным йодом. Не получил широкого распространения из-за необходимости применения радиоактивных материалов и специального оборудования. К тому же для постановки реакции нужно культивировать инфицированные вирусом клетки. Поэтому радиоиммунопреципитация применяется преимущественно в научно-исследовательских лабораториях.

Метод агглютинации является одним из наиболее простых, чувствительных и специфичных для определения антител к ВИЧ. Он не требует специального оборудования, необходим лишь некоторый опыт в интерпретации результатов.

II. Обнаружение антигенов ВИЧ

Обнаружение антигенов ВИЧ в исследуемом материале основано главным образом на тех же принципах, что и выявление антител, но с некоторыми модификациями. В связи с низким содержанием антигенов в крови, а также тем, они циркулируют в виде иммунных комплексов чувствительность составляет, в среднем, 60%. Поэтому иммуноферментные диагностикумы на антигены ВИЧ, в основном, используются только для экспериментальных и научно-исследовательских целей.

III. Выделение вируса.

Метод культуральной диагностикиВИЧ-инфекции широко не используется, хотя обладает высокой специфичностью. Он требует соблюдения особых условий безопасности, дорогостоящих и дефицитных сред, значительных затрат времени, и, кроме того, по данным некоторых исследователей, чувствительность метода колеблется от 25 до 75%.

IV. Обнаружение ДНК вируса.

Молекулярно-биологические методы. Успехи в развитии молекулярной биологии позволили вывести прямое выявление возбудителей инфекций на принципиально новый качественный уровень. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) благодаря высокой чувствительности, специфичности, воспроизводимости в настоящее время широко используется в биотехнологии, генетике, судебной медицине, для диагностики генетических и вирусных заболеваний, в том числе и ВИЧ-инфекции. Данный метод позволяет обнаружить геном ВИЧ, встроенный в геном пораженных лимфоцитов. Это возможно при наличии вирусных генов всего в 1 из 5000 клеток, даже в период отсутствия в крови антител или при недостаточном их уровне для обнаружения существующими стандартными методами. Так как методом ПЦР определяют не антитела к продуктам генов ВИЧ, а непосредственно генетические структуры, он незаменим при диагностике ВИЧ-инфекции в серонегативный период, у детей, рожденных ВИЧ-инфицированными матерями (персистенция материнских антител у ребенка может достигать 15 мес.), при неопределенных результатах ИБ, одновременной диагностике множественных инфекций, встречающихся при СПИДе, дифференциальной диагностике между ВИЧ-1, ВИЧ-2 и другими вирусными заболеваниями, определении соотношения между клеточным и внеклеточным вирусом, при испытаниях на животных химиопрепаратов и вакцин против СПИДа, исследовании банков крови и препаратов из крови.

В качестве материала для исследования в ПЦР может быть использована ДНК, выделенная не только из свежеполученных клеток и тканей, но и из замороженных, высушенных или фиксированных препаратов, имеющих частично разрушенные нуклеиновые кислоты.

Главным недостатком метода является дороговизна оборудования и реактивов для его проведения, но в конечном счете применение ПЦР экономически выгодно, так как значительно снижает количество стадий и продолжительность исследований на ВИЧ-инфекцию. Метод ПЦР удобен для изучения и диагностики ВИЧ-инфекции, особенно в тех случаях, когда серологические тесты или культивирование вируса затруднены или малоэффективны. Вместе с тем нельзя не отметить возможность получения при проведении ПЦР ложноположительных реакций.

Таким образом, современные методы лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции позволяют с достаточной степенью надежности проводить исследования по определению антител к ВИЧ и идентификации его компонентов. Однако постоянная изменчивость вируса, не имеющая аналогов по сравнению с изменчивостью других известных вирусов человека, создает риск получения в исследованиях ложноотрицательных результатов. Поэтому используемые в практической работе для диагностики ВИЧ-инфекции методы требуют постоянного совершенствования.