Схема и условия фотометрического определения

Анализ состоит из следующих стадий:

¨ Переведение анализируемого вещества в раствор и отделение при необходимости мешающих компонентов. Фотометрируемый раствор должен быть истинным во всем диапазоне определяемых концентраций.

¨ Анализируемый раствор должен обладать сильным селективным поглощением, т.е. быть окрашенным. Если раствор не имеет собственной окраски, его переводят в окрашенную форму, применяя ФМР. Необходимо подобрать фотометрический реагент и условие фотометрической реакции. ФМР подбирают так, чтобы молярный коэффициент светопоглощения окрашенной формы вещества был по возможности большим, а условия анализа (рН раствора, соотношение концентрации определяемого вещества и ФМР, температура, природа растворителя) – как можно проще.

¨ Приготовление раствора сравнения. Раствором сравнения может быть: 1) растворитель, содержащий все компоненты (ФМР и т.д.), кроме анализируемого вещества.; 2) раствор определяемого вещества, с которым проведены те же фотометрические реакции, что и с анализируемым раствором, но концентрация раствора точно известна.

¨ Изучение спектральной характеристики раствора. Падающий на анализируемый раствор свет должен быть монохроматическим. Для этого:

а) необходимо выделить λ_опт

б) сохранить λ = const при помощи светофильтра.

По максимальному светопоглощению выбирают оптимальную длину волны света l и светофильтр. В широком диапазоне длин волн выбирают оптимальную длину волны по самому узкому и высокому пику.

Окраска светофильтра должна дополнять окраску анализируемого раствора до белой (табл. 6).

Таблица 6

Области поглощения видимого света

¨ Выбор оптимальной толщины поглощающего слоя (длины кюветы). Для выбора оптимальной толщины поглощающего слоя проверяют выполнение закона Бугера – Ламберта. В наборе к фотометрическим приборам имеются кюветы с толщиной поглощающего слоя от 1 до 50 мм.

При выборе толщины слоя учитывают диапазон значений А, для которых относительная погрешность измерения минимальна (0,5–1,0 %): 0,1 < А < 0,8.

Оптимальная оптическая плотность: А = 0,45.

¨ Выбор интервала концентраций, при которых соблюдается закон Бугера-Ламберта-Бера. Готовят серию стандартных растворов и раствор сравнения. Выбирают концентрацию растворов для построения градуировочного графика.

Для раствора с минимальной концентрацией, помещенного в выбранную кювету, величина А должна быть не менее 0,1; для раствора с максимальной концентрацией А≤0,8:

При С_min l _max A ≥ 0.1

При С_max l_min A ≤ 0.8

Растворы, не удовлетворяющие таким требованиям, исключают из серии стандартных. Измеряют оптическую плотность стандартных растворов и строят градуировочный график.

¨ В идентичных условиях измеряют оптическую плотность анализируемого раствора и по градуировочному графику находят концентрацию определяемого вещества в растворе.