Приготовление бактериальной суспензии
Выросшую культуру микобактерий снимают с питательной среды Л-Й с помощью металлической петли и помещают в пробирку с 5-6 стеклянными бусами. При использовании металлической петли в пробирку внести предварительно 2 капли стерильной дистиллированной воды. Пробирку с бактериальной массой гомогенизируют в течение 1-2 минут на встряхивателе "Vortex", затем добавляют 7 мл дистиллированной воды и снова осторожно встряхивают до образования однородного раствора
Полученную суспензию оставляют на 1-3 минуты до осаждения крупных частиц. Затем гомогенную взвесь (верхнюю часть суспензии) собирают и переносят в сте-
рильную пробирку. Мутность гомогенной взвеси сравнивают со стандартом Мак-Фар ланда №1, постепенно добавляя дистиллированную воду до тех пор, пока густота взвеси не сравняется с густотой стандарта. Полученная суспензия называется
рабочей суспензией".
В дальнейшем из рабочей суспензии готовятся последовательные десятикратные разведения: 10-1; 10-2; 10-3; и 10-4
тля каждой суспензии используются разные 1мл градуированные пипетки).
Посев бактериальной суспензии:
a) в 2 пробирки со средой Л-Й без лекарств (контрольная пробирка) делают
посев 0,1 мл суспензии разведенной до 10-2 , 10-4 и распределяют по всей
поверхности среды.
b) в 2 пробирки со средой Л-Й, содержащей каждое лекарство делают посев 0,1
мл суспензии разведенной до 10-2 и распределяют по всей поверхности сре
ды.
Пробирки в термостате хранят в наклонном положении с неплотно прикрытыми крышками при температуре 370 С, до появления видимого роста на среде без лекарств, после чего в течение 4-6 недель с закупоренными пробками.
Дата добавления: 2015-08-04; просмотров: 2265;