Количественное определение. Для количественного определения кумаринов в лекарственном РС используют гравиметрические, титриметрические и физико- химические методы анализа.

Для количественного определения кумаринов в лекарственном РС используют гравиметрические, титриметрические и физико- химические методы анализа.

1. Гравиметрический (весовой) метод.

Основан на избирательной растворимости отдельных кумаринов в различных растворителях и способности лактонного кольца кумарина к раскрытию и обратному замыканию в зависимости от рН среды.

Используется редкотолько для определения суммы кумаринов.

2. Фотоэпектроколориметрический метод.

Основан на измерении оптической плотности окрашенного раствора, полученного

по реакции азосочетания с солями диазония при определенной длине волны.

Содержание суммы кумаринов рассчитывают по калибровочному графику, построенному по известному веществу.

3. Спектрофотометрический метод.

Основан на способности кумаринов поглощать монохроматический свет при определенной длине волны в зависимости от концентрации исследуемого раствора.

Метод используется как для определения содержания суммы кумаринов, так и индивидуальных веществ.

Для определения содержания бергаптена и изопимпинеллина в плодах амми большой используют хроматоспектрофотометрический метод.

Получают хлороформное извлечение из плодов амми большой в аппарате Сокслета. Затем методом хроматографии на бумаге в системе растворителей н-гептабензол (4:1) проводят разделение кумаринов, после разделения бергаптен и, изопимпинеллин идентифицируют в УФ-свете по характерному свечению. Каждое вещество отдельно элюируют 95%-ным этанолом и измеряют оптическую плотность растворов с помощью спектрофотометра: бергаптен при длине волны 313 нм, изопимпинеллин - 311 нм. Рассчитывают содержание каждого соединения с учетом удельного показателя поглощения.