Качественное определение.

Для обнаружения кумаринов в растительном сырье используют их лактонные свойства,

- вступать в реакцию разрыва лактонного кольца (лактонная проба);

- давать окрашенные растворы с диазосоединениями;

- флуоресцировать в УФ-свете.

Лактонная проба (предложена Г.А-Кузнецовой).

Реакция проводится c контрольным опытом.

Извлечение, содержащее кумарины, наливают в две пробирки.

В одну из них добавляют несколько капель 10%-ного раствора натрия гидроксида. Обе пробирки нагревают на водяной бане, затем в обе прибавляют 5 мл дистиллированной воды и хорошо перемешивают.

Если в пробирке, куда добавляли щелочь, раствор остался желтым и прозрачным, значит реакция положительна, так как образуется желтая растворимая в воде соль кумаровой кислоты.

В контрольной пробирке при добавлении воды раствормутнеет, кумарины не растворяются в воде и выпадают в осадок.

При подкислении щелочного раствора лактонное кольцо замыкается и кумарины выпадают в осадок.

Реакция образования азокрасителя.

Реакция проводится с продуктами, полученными после разрыва лактонного кольца.

В пробирку добавляют несколько капель свежеприготовленного диазореактива.

Чаще всего в качестве диазореактива используют диазосульфаниловую кислоту. Образуется краситель от желтого до вишнево-красного цвета.

3. Для идентификации кумаринов используют методы бумажной и тонкослойной хроматографии.

При этом используют системы растворителей;

- н-гексан-бензол-метанол (5:4:1);

- петролейный эфир-бензол-метанол (5:4:1);

- н-бутанол-уксусная кислота-вода (4:1:5).

Идентифицируют кумарины по характерной флюоресценции в УФ свете или проявляют хромогенными реактивами. В качестве проявляющих реактивов служат 1%-ный спиртовый раствор алюминия хлорида, 10%-ный раствор щелочи или пары аммиака.

Широкие возможности для обнаружения в растениях и сырье кумаринов, не только их суммы, но и отдельных соединений, открылись после внедрения хроматографического анализа. При этом указанные реактивы используют и для обработки хроматограмм.

4. Хроматографические методы удобны для выделения индивидуальных кумаринов.