Ход определения

Определение креатинина в сыворотке крови: 2 мл сыворотки смешивают с 6 мл насыщенного раствора пикриновой кислоты. Через 5 мин пробирку помещают на 15—20 сек. в кипящую водяную баню, затем центрифугируют. К 4 мл центрифугата добавляют 0,2 мл 2,5 моль/л раствора едкого натра и тщательно смешивают. Иногда после подщелачивания раствор мутнеет вследствие выпадения фосфатов. В этом случае раствор еще раз центрифугируют. Затем раствор доводят до объема 10 мл водой. Через 10 мин (не позже 20 мин) измеряют в кювете с толщиной слоя в 2 см при длине волны 500—560 нм (зеленый светофильтр) против холостой пробы.

Холостая проба: 3 мл насыщенного раствора пикриновой кислоты и 0,2 мл 2,5 моль/л раствора едкого натра доводят до объема 10 мл водой.

Расчет производят по калибровочному графику.

Построение калибровочного графика: из рабочего калибровочного раствора креатинина готовят разведения, как указано ниже.

Через 10 мин производят измерения при тех же условиях, что и опытные пробы. Калибровочная кривая линейна до 260 мкмоль/л креатинина.

№	Рабочий калибровочный раствор креатинина, мл	Раствор пикриновой кислоты, мл	2,5 моль/л раствор едкого натра, мл	Дистиллированная вода, мл	Концентрация креатинина в пробе, мкмоль/л
	0,4	3,0	0,2	До объема 10 мл
	0,8	3,0	0,2	До объема 10 мл
	1,6	3,0	0,2	До объема 10 мл
	2,4	3,0	0,2	До объема 10 мл
	3,2	3,0	0,2	До объема 10 мл

<38 39 404142 43 44 >

Дата добавления: 2015-03-23; просмотров: 1350;