Сопоставление редокс-потенциалов рибовлавина и метиленового синего.

Редокс-потенциалы являются мерой способности молекул обмениваться электронами. Вещество с большим окислительно-восстановительным потенциалом окисляет вещество с меньшим окислительно-восстановительным потенциалом. Для метиленового синего (±2 е) Е'_о составляет +0,011 В, у НАД+ (±2 е) - 0,320 В, у рибофлавина (±2 е) - 0,208 В, у цитохрома с (±е) + 0,260 В. Сравнивая стандартные редокс-потенциалы этих систем, можно заключить, что метиленовый синий пригоден для выявления восстановленных форм никотинамидных и флавиновых оксидоредуктаз.

В пробирку наливают 5 - 6 капель воды, 1 каплю раствора рибофлавина и добавляют по каплям раствор метиленового синего до появления зеленовато-синего окрашивания смеси. Бросают в окрашенную смесь кусочек цинка и капают 1 каплю конц. соляной кислоты. Выделяется водород, происходит восстановление метиленового синего и рибофлавина. Восстановление первого из них происходит быстрее, поэтому цвет смеси становится сначала зеленым, затем зеленовато-желтым и наконец бледно-желтым или розоватым. Жидкость сливают в другую пробирку и наблюдают за изменением цвета. Восстановленная форма рибофлавина через метиленовый синий передает электроны и ионы водорода на кислород воздуха и раствор желтеет. После этого происходит окисление лейкометиленового синего, и содержимое пробирки меняет цвет через зеленый в синий.