Опыт 10. Количественное определение аскорбиновой кислоты в моче методом Тильманса.

Количество витамина С в суточном объеме мочи зависит от содержания его в пище, потребности в нем организма, возраста человека, способности слизистой кишечника к всасыванию. В среднем здоровый человек выделяет 20-40 мг витамина С. По количеству витамина С, выведенного с мочой за сутки, можно судить об обеспеченности организма аскорбиновой кислотой. Более надежным методом диагностики гиповитаминоза является проба с нагрузкой аскорбиновой кислотой.

Метод основан на окислении аскорбиновой кислоты в дегидроаскорбиновую кислоту 2,6-дихлорфенолиндофенолом, который в кислой среде восстанавливается в бесцветное лейкосоединение.

Наливают в коническую колбочку 10 мл мочи, добавляют 10 мл дистиллированной воды и 1 мл концентрированной уксусной кислоты. Содержимое колбы титруют из микробюретки 0,001 н раствором натриевой соли 2,6-дихлорфенолиндофенола до получения устойчивой розовой окраски.

Содержание витамина С в суточном количестве мочи вычисляют по формуле:

где х – количество аскорбиновой кислоты, выделенное с мочой за сутки, мг; 0,088 - количество аскорбиновой кислоты, соответствующее 1 мл 0,001 н раствора натриевой соли 2,6-дихлорфенолиндофенола, мг; V₁ – общий объем мочи, собранной за сутки, мл; V₂ - количество мочи, взятое для титрования, мл. Для женщин суточное количество мочи в среднем 1200 мл, для мужчин – 1500 мл.

Контрольные вопросы

1. Какие вещества относятся к витаминам? Какова их общая функция в организме?

2. Перечислите биохимические функции витаминов, определение которых проводилось в лабораторной работе.

3. Дайте определение авитаминозам, гипо- и гипервитаминозам.

4. Какие методы, кроме титриметрического, могут использоваться для количественного определения витаминов?