Окраска по Граму в модификации Хукера.
| Раствор А для приготовления красящего реактива: | |
| Кристаллический фиолетовый (с 90% содержанием сухого вещества) | 2,0 г |
| Этанол 95% (объем/объем) | 20 мл |
| Раствор Б для приготовления красящего реактива: | |
| Щавелевокислый аммоний | 0,8 г |
| Дистиллированная вода | 80 мл |
Растворы А и Б смешивают для получения красящего реактива кристаллического фиолетового. Оставляют на 24 ч и перед использованием фильтруют через фильтровальную бумагу.
| Протрава: | |
| Йод | 1,0 г |
| Йодистый калий | 2,0 г |
| Дистиллированная вода | 300 мл |
Йод и йодистый калий размельчают в ступке и медленно добавляют воду при постоянно продолжающемся размельчении, пока йод не растворится. Хранят в темной склянке.
| Растворитель для обесцвечивания: | |
| Этанол 95% (объем/объем) | |
| Дополнительный краситель: | |
| Сафранин О [2,5% (вес/объем) в 95% (объем/объем) этаноле] | 10 мл. |
| Дистиллированная вода | 100 мл |
Выполнение метода:
1. Высушенный на воздухе фиксированный нагреванием бактериальный мазок погружают на 1 минуту в красящий раствор кристаллического фиолетового.
2. Мазок промывают в слабой, идущей под углом струе водопроводной воды в течение 2 с.
3. Мазок помещают в йодную протраву на 1 минуту.
4. Промывают его в слабой, идущей под углом струе водопроводной воды в течение 2 с, после чего подсушивают промокательной бумагой.
5. Погружают мазок на 30 с в 95%-ный этанол, взбалтывая последний, после чего мазок подсушивают промокательной бумагой.
6. Погружают мазок на 10 с в дополнительный краситель.
7. Промывают мазок в слабой, идущей под углом струе водопроводной воды до исчезновения окраски в стоке, после чего подсушивают промокательной бумагой.
Дата добавления: 2014-12-06; просмотров: 1965;