Робота 43
Вплив цитокінінів на приріст маси сім’ядоль огірка
Для з’ясування характеру впливу нових фізіологічно активних речовин та визначення активності неідентифікованих сполук часто використовують метод біотестів, тобто визначення фізіологічної активності препаратів на спеціальних клітинних системах, чутливих до дії окремих фітогормонів. Розроблено і детально описано клітинні систем, які специфічно реагують на дію фітогормонів. Так, відомі біотести для дослідження ауксинової активності за вкоріненням стеблових та листкових живців, інтенсивності ризогенезу, визначенню кута нахилу колеоптилів злаків, аналізу динаміки розтягу клітин різних тканин рослини. Дослідження гіберелінів в основному здійснюється за допомогою біотестів, в яких простежується залежне від концентрації фітогормону прискорення росту стебла паростків гороху, салату та інших культур. Відомий також тест на гіберелін-подібну активність за аналізом утворення ГК-індукованої α-амілази. Є численні біотести для визначення цитокінінової активності за інтенсивністю синтезу амарантину в сім`ядолях щириці, активації проростання насіння, збільшення маси сім’ядоль, листків, затриманні їхнього пожовтіння, інтенсивності позеленіння, швидкості в’янення експлантів проростків.
Мета роботи: ознайомитися із методом біотестів на цитокінінову активність, з’ясувати і пояснити характер впливу цитокінінів на зміну маси ізольованих сім’ядоль огірка.
Прилади і матеріали дослідження:вага торзійна;термостат; колби на 100 мл; ножиці; чашки Петрі (d=40 мм); пінцети; розчин 6-бензил-амінопурину (6-БАП) 10-3М;дистильована вода; фільтрувальний папір; маркер або склограф; 5-добові рослини огірків сорту Далекосхідний, вирощені в темряві.
Хід виконання роботи
1.Готують серію розчинів 6-БАП у концентраціях від 10-3Мдо10-9М, розводячи вихідний розчин. Для цього використовують колби на 100 мл.
2.Від рослин огірків відокремлюють сім’ядолі. Одну із сім’ядоль зважують на торзійній вазі (вважають, що маса обох сім’ядоль однієї рослини є однаковою). Маса сім’ядоль має бути в межах 22-26 мг. Масу обох сім’ядоль заносять у таблицю і зважені сім’ядолі розкладають у чашки Петрі по 10 штук у кожну на змочений у дистильованій воді чи розчині 6-БАП, фільтрувальний папір. Сім’ядолі розкладають пінцетом за годинниковою стрілкою від нанесеної позначки.
3.Чашки Петрі з сім’ядолями інкубують у темному термостаті протягом 24-х годин при температурі 24±1°С.
4.Через 24 години сім’ядолі повторно зважують. Дані заносять у таблицю:
| Концент-рація 6-БАП, М | Маса сім’ядоль, мг | Приріст маси | ||
| початкова | кінцева | М±m, мг | % до контролю | |
| Контроль, Н2О | ||||
| 10-3М | ||||
| 10-4М | ||||
| 10-5М | ||||
| 10-6М | ||||
| 10-7М | ||||
| 10-8М | ||||
| 10-9М |
5.За результатами зважування будують криву залежності приросту маси сім’ядоль від концентрації 6-БАП.
6.Роблять висновок.
Дата добавления: 2014-12-26; просмотров: 564;