Методы (разновидности) МКР.

Основной метод-активация существующих меристем при снятии апикального доминирования (доминирующие верхушки).

2 пути: 1) Удаление верхушечных меристем стебля, чтобы убрать источники гармонов с последующим микрочередованием побега in vitro

2) Добавление в питательную среду цитокининов (6-БАП).

Полученные побеги отделяют от экспланта и вновь культивируют на свежеприготовленной питательной среде, стимулируют пролиферацию (деление клеток) пазушных меристем, возникают побеги более высоких порядков. Используют метод для размножения плодовых культур, ряда древесных и множества травянистых. Из 1 меристемы 105 растений в год.

2методиндукция возникающих адвентивных почек из ткани экспланта - основан на способности к регенерации любых организмов и тканей в единое целое растение. Питательная среда содержит 100% цитокинина, иногда 10% ауксина- самый распространенный метод для размножения цветов, овощей и др. Морфогенетическая активность экспланта продолжается до 4 лет, из 1 растения в год до миллиона в год.

3 метод дифференциация соматических клеток в зародышеподобные структуры, напоминающие обычные зиготические зародыши, которые получаются из экспланта. Основное отличие образовавшегося зародыша in vitro от in vivo в том, что соматический зародыш развивается из ткани экспланта асексуально вне зародышевого мешка и напоминает биполярную структуру с одновременным развитием стебля и корня.

Они проходят 3 стадии развития:

- глобулярная стадия;

- сердцевидная стадия;

-торпедовидная стадия, развивается в проросток.

Таким путем можно размножать часть древесных пород (дуб, ель…). Формирование эмбрионов происходит в 2 этапа. 1) дифферинциация клеток экспланта за счет добавления в среду ауксинов. 2) На следующей стадии сформировавшиеся клетки развиваются в эмбриоиды при отсутствии ауксинов в среде.

Соматический эмбриогенез происходит в тканях первичного экспланта и в каллусной культуре, как правило, эмбриогенез проводят в суспензионной культуре, однако при этом полностью исключается такой опасный этап как адаптация растений к среде, поскольку соматический зародыш копирует свойство настоящего. При использовании соответственной техники капсуляции эмбриоидов можно получить искусственные семена.

4 метод Дифференциация адвентивных почек в первичные пересадочные каллусные ткани. Метод используется очень редко, т.к., чреват накоплением мутаций, вплоть до полиплоидии, а также возможной низкорослостью и неправильным расположением листьев. Однако есть и положительные моменты, т.к., этот метод экономически эффективен, поскольку из каждой клетки может образоваться новое растение. Только так можно размножать растения в культуре тканей и в трех методах очень важен для селекции по хозяйственно-ценным признакам. Этот метод показан для растений со стабильной генетикой каллуса и слабой изменчивостью растений-регенерантов.