Получение готовой продукции
Получение готовой продукции связано с сушкой и консервированием биопрепаратов. Объект сушки - живые микроорганизмы, клетки, ферменты, гормоны и др. БАВ. Биопрепараты кроме биологически активной составляющей содержат органические соединения и значительное количество воды. Вода в продуктах биосинтеза может быть в свободном или связанном состояниях; значительная часть воды удерживается в субстрате физико-механическими и адсорбционными связями (вандерваальсовы силы). Физико-механически связанная вода находится в порах и капиллярах материала.
Для высушивания биопрепаратов применяют методы, не приводящие к потере биологической активности, где доминирует сублимационная сушка (установки типа «Иней» Института биологического приборостроения, г. Пущино (Россия), «Юзефруа» (Франция), «Неto - Неlton» (Дания).
Использование распылительных сушилок ограничено по причине сравнительно жестких условий сушки.
Термолабильные и неустойчивые по ряду показателей биопрепараты при высушивании в суспензиях (не содержащих защитных сред) подвержены существенным структурным и морфологическим изменениям. Это может сопровождаться утратой жизнеспособности и разрушением клеточных структур.
Среды высушивания (защитные среды) - криопротекторы. Денатурирующее влияние замораживания сдерживается инактивацией (изменением свойств) защитных агентов:
высокомолекулярных компонентов (ПВП м.м. от 2600 до 6400 -
декстран, желатин, пептон);
низкомолекулярных и буферных компонентов (глютамат, трис-
буфер).
Защитная среда предохраняет биопрепараты от необратимых изменений в процессе замораживания, высушивания и при последующем хранении. Защитные среды, как правило, состоят из нескольких компонентов. Так, для консервирования клеточных культур используют крио-защитные свойства глицерина и DMSО, их добавляют к питательной среде в концентрации 5-10%. При температуре минус 180-196 °С жизнеспособность законсервированной культуры может сохраняться неограниченно долго.
Розлив, укупорку, этикетировку, упаковку готовой продукции проводят в отдельных аппаратах (при малотоннажном производстве); это компактные установки для ампул, ёмкостей для инфузий; машины для укладки, упаковки.
Технологические линии (крупномасштабное промышленное производство) включают:
•УЗ-моечные машины;
•стерилизационные сушильные туннели (с ламинарными потоками горячего воздуха);
•машины для наполнения и запайки ампул;
•машины наполнения и запайки ёмкостей для растворов внутривенного введения (электронно-турбинный розлив в соответствии с GМР);
• машины для наполнения и запайки порошкообразных препаратов;
•машины для наполнения и укупорки флаконов с навинчивающимся колпачком и специальной насадкой;
•наполнительные и укупорочные машины для инъекций;
•машины для нанесения кода (маркировка цветным кольцом);
•машины для контроля на герметичность;
•этикетировочные машины;
•машины для капсулирования порошков;
•машины для сборки, наполнения, запайки шприц-тюбиков. Отдельные установки и технологические линии выпускают фирмы
Америки, Швейцарии, Франции, Германии, Финляндии; установки этих фирм отвечают требованиям СМР.
Тест-контроль к главе 5 Выберите правильные ответы:
1. Назначение питательных сред:
А - защита клеток от воздействия факторов внешней среды;
Б — поддержание оптимальных для роста клеток физико-химических
условий;
В — обеспечение клеток питательными веществами для синтеза
биомассы;
Г - обеспечение клеток питательными веществами для синтеза необходимых продуктов жизнедеятельности;
Д - все вышеперечисленное верно.
2. Источники серы в питательных средах:
А - сероводород;
Б - сульфаты;
В - цистеин;
Г — кристаллическая сера;
Д - серная кислота.
3. Обеспечение и сохранение стерильности питательных сред обеспечивают:
А - стерилизацией исходных компонентов среды;
Б - термической стерилизацией среды;
В - стерилизующей фильтрацией;
Г - добавлением антибиотиков;
Д - все вышеперечисленное верно.
4. Режим хранения культур-продуцентов предполагает:
А - замораживание при температуре ниже -20 °С;
Б - замораживание при температуре ниже -2...-5 °С;
В - лиофильное высушивание;
Г - консервирование;
Д — термостатирование при 37 °С.
5.Описание морфологических, физиологических характеристик питательные сред, условий выращивания и срока хранения культуры изложены в:
А - ГФ XII издания;
Б - паспорте на штамм культуры;
В - справочной и научной литературе;
Г - нормативном документе на продуцируемый препарат;
Д - упаковке.
6.Признаки поверхностного способа культивирования:
А - твердая питательная среда;
Б - монослой суспензии клеток;
В - фиксирование клеток на поверхности реактора;
Г - использование микроскопических гранул-носителей;
Д - все вышеперечисленное верно.
7. Продолжительность лаг-фазы культивирования определяется:
А - временем прогрева питательной среды;
Б — продолжительностью стационарной фазы;
В - отличиями среды хранения и среды культивирования;
Г - фазой роста исходной культуры;
Д - скоростью перемешивания питательной среды.
8. Фаза культивирования, характеризующаяся максимальным накоплением вторичных метаболитов (антибиотиков):
А — лаг-фаза;
Б - фаза ускорения;
В - экспоненциальная или логарифмическая фаза;
Г - фаза замедления;
Д - стационарная фаза;
Е - фаза отмирания.
9. Время добавления порций субстрата при периодическом культивировании определяется по:
А-рН;
Б - количеству синтезированных продуктов (кислот);
В - объему реактора;
Г - скорости перемешивания питательной среды;
Д — плотности питательной среды.
10. Культуры с высокой плотностью получают:
А - добавлением больших количеств питательных веществ;
Б - оптимизацией состава культуральной среды;
В - культивированием при избыточном давлении воздуха (кислорода);
Г - культивированием при пониженном давлении воздуха;
Д - снижением температуры культивирования.
11.Отличительные признаки эрлифного реактора:
А - механическое перемешивание культуральной жидкости;
Б — перемешивание среды барботированием;
В ~ циркуляция среды за счет потока воздуха;
Г - циркуляция среды за счет электромагнитных волн;
Д - циркуляция среды за счет тепловой конвекции.
12. По эффективности биореакторы располагаются в следующем порядке:
А — с механическим перемешиванием - барботажные — эрлифтные;
Б - барботажные — эрлифтные — с механическим перемешиванием;
В - эрлифтные - барботажные - с механическим перемешиванием;
Г - барботажные - с механическим перемешиванием - элифтные;
Д - с механическим перемешиванием - эрлифтные - барботажные.
13. Стерилизация биоректора осуществляется:
А - дезинфицирующими растворами;
Б - ультрафиолетовым облучением;
В — влажным паром под давлением;
Г - сухим воздухом под давлением;
Д - стерильным раствором питательной среды.
14. Процесс ферментации контролируют по:
А - концентрации минеральных веществ;
Б - концентрации растворенного кислорода;
В - рН;
Г - температуре;
Д - интенсивности перемешивания биомассы.
15. Контроль биомассы осуществляют по:
А - числу клеток и их линейных размеров;
Б - числу жизнеспособных клеток (методом окрашивания);
В - интенсивности дыхания (накоплению СO2);
Г - содержанию белка;
Д — кондуктометрически.
16. Характерные признаки апоптоза клетки:
А - генетическая детерминанта, участие специальных внутриклеточных механизмов;
Б - непрограммируемая гибель клеток;
В - программируемый характер гибели клетки;
Г - процесс гибели неуправляем;
Д — процесс гибели обратим.
17. Для выделения клеток из культуральной среды используют:
А - флотацию;
Б - седиментацию;
В - сепарацию;
Г - центрифугирование;
Д - фильтрование.
18.Химический метод разрушения клеток используют при:
А - устойчивости получаемого продукта к щелочной среде;
Б - нестабильности получаемого продукта в щелочной среде;
В - термической устойчивости получаемого продукта;
Г - термолабильности получаемого продукта;
Д - любых условиях.
19. Баллистическая дезинтеграция клеток основана на:
А — бомбардировке клеточной массы тяжелыми ядрами;
Б - сдвиговых напряжениях поверхности инертных шариков, лопастей и реактора;
В — ударном воздействии клеток о неподвижную поверхность;
Г - обработке УЗ;
Д - воздействии высокого давления.
20.Состав клеточной стенки грамположительных бактерий:
А — частично фосфорилированные маннаты и (3-глюканы;
Б — а- и р-глюканы, гликопротеиды и хитин;
В — пептидогликановый слой N-ацетилглюкозамина и остатков N-ацетилмурамовой кислоты, соединенных пептидными мостиками;
Г - фосфолипиды;
Д - целлюлоза.
21. Назначение защитных сред:
А — защита от изменений в процессе замораживания;
Б — защита от изменений в процессе высушивания и при последующем хранении;
В - повышение устойчивости к антибиотическим веществам;
Г — дополнительный источник питательных веществ;
Д - защита от влияния продуктов метаболизма.
22. Функцию защитных сред способны выполнять:
А — высококонцентрированные минеральные соли;
Б — ВМС (ПВП, декстран, желатин, пептон);
В - ПАВ (твин-80, спены);
Г - аэросил;
Д - низкомолекулярные и буферные компоненты (глютамат, трис-буфер).
Дата добавления: 2016-02-24; просмотров: 1761;