Микробиологическая чистота.

Количественное определение

1.Общим фармакопейным методом количественного определения производных пара-аминобензойной кислоты (анестезина, новокаина и дикаина) является нитритометрия. Это метод объемного анализа, при котором используется титрант – раствор нитрита натрия. Он применим для количественного определения соединений, содержащих:

1. первичную ароматическую аминогруппу ПАА (новокаин, анестезин)

2. вторичную ароматическую аминогруппу (дикаин) с образованием

N-нитрозопроизводных

3. нитропроизводные ароматического ряда после предварительного восстановления нитрогруппы до аминогруппы (левомицетин)

4. ацилированные производные первичной ароматической аминогруппы после предварительного гидролиза (парацетамол).

5. для определения гидразидов (изониазид), образуются азиды.

Основными условиями титрования, гарантирующими количественное протекание этой реакции, являются:

1. среда кислая разведенной хлороводородной кислоты, т.к. диазотирующим агентом является азотистая кислота, т.е. реакция идет только в среде НСI.

NaNО₂ + НСI → NaCI + HNО₂

2. процесс диазотирования катализируется, катализатор - КВг (он ускоряет реакцию и стабилизирует соль диазония), добавляют 1,0 KBr.

3. Титрант нитрит натрия в присутствии KBr в кислой среде NaNО₂ образует высоко реакционноспособный агент - нитрозил бромид.

NaNО₂ + KBr + 2НСI → О=N-Br + 2NaCI +Н₂О

4. временной режим. Медленное титрование (т.к. соль диазония образуется не сразу, а через ряд промежуточных стадий).

Титруют при постоянном перемешивании, добавляя титрант в начале титрования со скоростью 2мл/мин, а в конце титрования (примерно за 0,5 мл до точки эквивалентности) по 0,05 мл(1 капля) в минуту. Поэтому необходим расчет ориентировочного расхода титранта (Vор.).

5. температурный режим. Титрование проводят при пониженной температуре 15-20^оС, а в некоторых случаях при охлаждении до 0-5^оС (ледяная баня), так как соли диазония неустойчивы и легко разлагаются;

6. точку эквивалентности устанавливают одним из следующих методов:

а) потенциометрическим титрованием (по скачку потенциала) или титрованием «до полного прекращения тока»

б) с помощью внутренних индикаторов:

· тропеолин 00 (переход окраски из красного в желтый)

· тропеолин 00 + метиленовый синий (красно-фиолетовый – голубой)

· нейтральный красный (красно-фиолетовый – синий)

Индикаторы в точке эквивалентности окисляются нитритом натрия и их окраска меняется.

в) с помощью внешнего индикатора – йодкрахмальной бумаги (см. парацетамол). Это фильтровальная бумага, пропитанная растворами калия йодида и крахмала. Титрование ведут до тех пор, пока капля титруемого раствора, взятая через минуту после добавления раствора нитрита натрия, не будет вызывать немедленного посинения бумаги. При наличии избытка нитрита натрия на йодкрахмальной бумаге идет реакция:

2KI + 2 NaNO₂ + 4HCl → I₂ + 2NO↑ + 2NaCl + 2KI + 2H₂O

изб.капля

I₂ + крахмал → синее окрашивание

Указания по каждому параметру титрования имеются указания в фармакопейных статьях на препараты.