Занятие № 9

ТЕМА. МИТОХОНДРИАЛЬНАЯ ЦЕПЬ ПЕРЕНОСА ЭЛЕКТРОНОВ И ПРОТОНОВ. ОПРЕДЕЛЕНИЕ МАКРОЭРГОВ.

Цель занятия: 1.Сформировать знания о биологическом окисле

нии как источнике энергии в живых системах.

2.Усвоить структуру и биологическую роль макроэргов, ды-

хательных ферментов и их коферментов.

3.Познакомиться с методикой определения макроэргов.

Исходный уровень знаний:

- понятие об обмене веществ, его составных частях;

- связь обмена веществ с обменом энергии;

- строение клетки, роль митохондрий;

- химическая природа ферментов;

- коферментная функция витаминов.

Содержание занятия.

I.2. Основные этапы обмена веществ.

Соотношение понятий метаболизм, анаболизм, катаболизм.

Общие понятия о метаболических путях и энергетическом

обмене.

Биологическое окисление и тканевое дыхание.

Дегидрирование субстратов как источник энергии для синтеза АТФ.

Состав цепи переноса электронов и протонов при окислении субстратов.

Роль витаминов в тканевом дыхании.

Структура и функция коферментов дегидрогеназ.

Работа № 1. КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ МАКРО-

ЭРГИЧЕСКИХ СОЕДИНЕНИЙ МЫШЦ (АТФ И КРЕАТИНФОСФАТА)

АТФ и креатинфосфат являются основными макроэргами мышечной ткани. АТФ синтезируется главным образом в процессе окислительного фосфорилирования, а креатинфосфат – при участии АТФ в состоянии мышечного покоя. При активной работе мышц креатинфосфат дает энергию для синтеза АТФ из АДФ.

Принцип метода.

Фосфатные остатки АТФ и креатинфосфата легко отщепляются при кислотном гидролизе (т.н. лабильно связанный фосфор). Сравнивают содержание неорганического фосфора в пробах до и после гидролиза по цветной реакции с молибдатом аммония в присутствии аскорбиновой кислоты.

Порядок выполнения работы.

В пробирку внести 0,5 г мышечной кашицы, поместить на ледяную баню и добавить 5 мл охлажденного раствора ТХУ. Содержимое пробирки помешивать стеклянной палочкой в течение 5 мин. Экстракт профильтровать в мерную пробирку, стоящую на ледяной бане. Остаток кашицы залить дистиллированной водой (5 мл), через 5 мин. профильтровать в ту же мерную пробирку и довести объем фильтрата до 10 мл, добавив дистиллят.

Расчет. Определить разницу между оптической плотностью опытной пробы и контрольной. По калибровочному графику найти концентрацию лабильно связанного неорганического фосфора (А) в пробе.

Х = А ∙ ( 3,3 ∙ 400 ) ∙ 100, где

Х – содержание макроэргов в мг/100г (мг%),

А – содержание АТФ в пробе.

3,3 ∙ 400 – коэффициент пересчета на 1 г ткани с учетом разведения растворов

РЕЗУЛЬТАТ:

III.2.Контрольные вопросы.

Что такое макроэрги? Приведите примеры.

Какие пути образования АТФ вы знаете?

Где и когда образуется креатинфосфат?

Какова биологическая роль креатинфосфата?

Материал для самоподготовки: I а)I. с.305–311; II; III.