Методика окраски

Поместите пронумерованные мазки на мостик в количестве, удобном и безопас­ном для работы (максимум 12). Убедитесь, что мазки не соприкасаются друг с дру­гом.

1. Залейте все предметное стекло раствором аурамина О и оставьте на 15 минут
для прокрашивания. Убедитесь, что раствор остался на предметных стеклах.
Не нагревайте и не используйте фильтровальную бумагу

2. Промойте мазки дистиллированной водой и удалите жидкость

3. Залейте обесцвечивающим раствором или 3,0% солянокислым спиртом на 3-
5 минут;

4. Промойте дистиллированной водой и удалите оставшуюся жидкость

5. Залейте мазки одним из приготовленных растворов: перманганата калия, ак­
ридинового оранжевого на 2 минуты, кислого фуксина и 0,25% водным ра­
створом метиленового синего на 3-5 минут и оставьте для прокрашивания

6. Промойте мазки дистиллированной водой

7. Оставьте мазки высыхать на воздухе, ни в коем случае не промокайте их филь­
тровальной бумагой и т. д.

8. Просматривайте мазки как можно скорее после приготовления.

Предосторожности во время окрашивания:

1. Не сокращайте время экспозиции с раствором солянокислого спирта или сер­
ной кислоты.

2. Избегайте приготовления слишком толстых мазков. Это может воспрепят­
ствовать качественному контакту с обесцвечивающим реактивом, а фоновый
краситель может полностью затушить присутствие кислотоупорных бакте­
рий. Толстые мазки могут отслаиваться, что приведет к потере материала и
возможному переносу его на другие мазки. Слишком интенсивное фоновое
окрашивание может маскировать присутствие кислотоупорных палочек

3. Мазки, окрашенные люминесцентными реактивами, следует просмотреть в
течение 24 часов после приготовления

4. При люминесцентной микроскопии микобактерии выглядят в виде светящих­
ся палочек. Фон мазка зависит от используемого красителя: бледно-желтый
фон определяется перманганатом калия, оранжевый фон - акридиновым оран­
жевым, малиново-красный до черного фона - кислым фуксином, темный фон
- метиленовым синим.