Опыт действия лизоцима на различные виды микробов
В 5 пробирок наливают по 0,9 мл 0,5% раствора поваренной соли, после чего в первую пробирку добавляют 0,1 мл лизоцима и готовят десятикратные разведения путем переноса из предыдущей пробирки в последующую по 0,1 мл до разведения 1 : 10000 (четвертая пробирка). Пятая пробирка, контрольная, она не содержит лизоцима. Во все пробирки вносят по 0,5 мл стандартизованной одномиллиардной взвеси Е. coli , содержимое пробирок перемешивают и помещают в термостат при 37° на 3 часа, после чего учитывают результаты и отмечают наибольшее разведение лизоцима, вызвавшее лизис микроорганизмов.
Для приготовления одномиллиардной взвеси бактерий необходимо взять односуточную культуру бактерий на скошенном МПА и смыть 0,5% раствором поваренной соли. Для смыва в пробирку с культурой микробов стерильно добавляют пипеткой 1—1,5 мл 0,5% раствора поваренной соли, вращая пробирку между ладонями. Полученную суспензию стерильной пипеткой перемещают в пустую пробирку и стандартизуют по оптическому стандарту, разводя имеющуюся суспензию микробов до 1 млрд. микробных тел в 1 мл 0,5% раствором хлористого натрия.
Морфология бактерий – размер, форма и взаимное расположение бактериальных клеток
Схема описания морфологии бактерий в мазке:
1. Форма
2. Размеры
3. Характер концов (для палочек)
4. Взаиморасположение
Контрольные вопросы:
1. Какие виды и формы иммунитета Вы знаете?
2. Перечислите факторы неспецифической резистентности.
3. Охарактеризуйте пути активации комплемента.
4. Механизмы действия интерферонов.
5. Назовите стадии фагоцитоза
6. Какова биологическая роль незавершенного фагоцитоза?
Обязательная:
1.Хаитов P.M., Игнатьева Г.А.,Сидорович И.Г. Иммунология:Учебник.—М.:Медицина,2000.— 432 с : ил.(Учеб. лит. для студ. медвузов).
2.Ковальчук Л.В и др. Иммунология: практикум: учеб. пособие – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2012. – 176 с.
3.Поздеев О.К. Медицинская микробиология / под ред. акад. РАМН В.И. Покровского - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2001. – 768 с.
4.Борисов Л.Б. Руководство к практическим занятиям по микробиологии. М. 1997 г.
Дополнительная:
1.Генкель П.А., Микробиология с основами вирусологии. М.,1974 г.
2.Коротяев А.И., Бабичев С.А. Медицинская микробиология, иммунология и вирусология: учебник для мед. вузов.- 3-е издание, испр. и доп. – СПб, СпецЛит. 2002. – 591 с.
3.Борисов Л.Б., Смирнова А.М., Медицинская микробиология, вирусология, иммунология, М., Медицина. 1994 г.
4.Тимаков В.Д., Левашов В.С., Борисов Л.Б. Микробиология. М. 1983 г.
Тема № 3: ИММУНИТЕТ: АНТИГЕНЫ И АНТИТЕЛООБРАЗОВАНИЕ, ИММУННЫЕ РЕАКЦИИ.
Цель: Познакомиться со строением и свойствами антигенов и антител, познакомиться с основными формами иммунного реагирования. Познакомиться с особенностями протекания реакций Аг+Ат. Научиться осуществлять постановку ориентировочной и развернутой реакции агглютинации
Вопросы для самоподготовки:
1. Антигены. Химическая природа, антигенность, иммуногенность, специфичность, детерминантные группы. Гаптены. Т-зависимые и Т-независимые антигены. Микробные антигены,
2. Антитела. Классификация, строение. Биологическая роль.
3. Схема иммунного ответа. Первичный и вторичный иммунный ответ.
4. Динамика накопления антител, фазы антителообразования. Иммунизация и гипериммунизация, ревакцинация.
5. Механизм реакций АГ+АТ. Стадии и компоненты
6. Реакция агглютинации.
7. Получение диагностических препаратов (агглютинирующая сыворотка, диагностикум.
План:
Программа:
1.Строение и свойства антигенов.
2.Строение и свойства антител.
3.Основные формы иммунного реагирования.
4.Методы выявления и идентификации специфических антигенов, основанные на реакциях связывания антигена с антителами, проявляющихся изменением свойств антигена: реакция агглютинации.
Демонстрация:
1. Наборы ингредиентов для реакции агглютинации.
2. Постановка ориентировочной реакции агглютинации
3.Результаты постановки развернутой реакции агглютинации
Задание студентам:
1.Зарисовать схемы первичного и вторичного иммунного ответа, отметить сходства и различия.
2.Поставить ориентировочную реакцию агглютинации на стекле с целью идентификации выделенной чистой культуры бактерий. Сделать заключение по результатам реакции.
3. Поставить развернутую реакцию агглютинации для определения серотипа бактерий.
4.Протоколировать и оценить результаты развернутой реакции агглютинации.
Дата добавления: 2015-02-10; просмотров: 990;