Иммунологические методы

1. Методы определения веществ, характеризующихся наличием АТ против них

Методы иммуноанализа

а) РА

б) Методы гемолиза

в) РП

г) ИФА, РИА, иммунофлюоресцентный анализ

2. Методы фракционирования

а) Выделение Ig солями серной кислоты

б) Методы хроматографии

в) Центрифугирование в средах с градиентами плавучей плотности

г) Электрофорез

д) Проточная цитофлюометрия

3.Иммуногистохимические методы

4. Методы молекулярной биологии (ПЦР)

1. Генетические методы

а) Методы направленного мутагенеза

б) Методы изучения экспрессии генов и методы картирования и исследования мутаций

5. Методы биотехнологии – клонирование молекул, ПЦР, получение рекомбинантных белков, создание инбридных генов

6. Методы изучения свойств нативных клеток иммунной системы в культурах in vitro

7. Методы исследования функции и взаимодействия клеток in vivo

По определению экспертов ВОЗ Клиническая иммунология – это клиническая и лабораторная дисциплина, занимающаяся изучением вопросов диагностики и лечения больных с различными патологическими состояниями, в основе которых лежат иммунологические состояния (механизмы) и состояния, в терапии и профилактике которых иммунопрепараты играют ведущую роль.

Клиническая иммунология и иммунологическая служба должны состоять из клинической и лабораторной составляющих.

Лабораторная иммунологическая диагностика – одно из направлений клинической лабораторной диагностики должна развиваться в соответствии с нормативной базой, принятой для подразделений лабораторной службы.

В РФ создана сеть лабораторной клинической иммунологии, разработана методология оценки иммунного статуса населения. В соответствии с решением Комиссии МЗ СССР (№16-1 от 22.08.1990 г.) «О развитии клинической иммунологии» в стране в некоторых городах (Москва, Владивосток, Омск, Тюмень, Екатеринбург) созданы региональные центры клинической иммунологии.

Для того, чтобы иммунологическая диагностика могла эффективно использоваться клиницистами, необходимо сформулировать основные принципы организации иммунологической лаборатории.

1. Востребованность клиницистами

2. Минимум «ненужных» анализов,

3. Преемственность лабораторных иммунологических исследований

4. Стандартные протоколы методов

5. Контроль качества

6. Рентабельность лаборатории.

Первый официальный документ, регламентирующий деятельность иммунологической лаборатории – Приказ МЗ СССР (№539 от 18.04.1986 г.) «Об организации лабораторий клинической иммунологии» обязывал определять 6 показателей периферической крови:

1. Количество Т-лимфоцитов

2. Количество В-лимфоцитов

3. Количество фагоцитирующих нейтрофилов

4. Иммуноглобулины А, М, G сыворотки крови

Успехи фундаментальной иммунологии, основанные на достижениях молекулярной биологии и генной инженерии, обусловили новый этап в развитии иммунологических лабораторий. В конце прошлого века стало очевидно, что большинство областей клинической медицины нуждаются в помощи иммунологических лабораторий. Инфекционисты, кардиологи, дерматологи, эндокринологи, ревматологи и другие врачи нуждаются в обнаружении и количественном определении специфических антител или аутоантител в сыворотке крови, на мембранах циркулирующих клеток и в тканях.

С заболеваниями, в патогенезе которых ведущую роль играют аллергические реакции, сталкиваются представители других клинических специальностей.

Таблица 1.Участие аллергических реакций разных типов в патогенезе патологических состояний, встречающихся в различных клинических дисциплинах

Врачи разных специальностей ставят перед иммунологической лабораторией задачу выявления иммунодефицитных состояний. Диагноз «иммунодефицит» является лабораторным диагнозом.

При многих заболеваниях иммунологическая лаборатория необходима при оценке прогноза заболевания, стойкости ремиссии, вероятности рецидива, полноты выздоровления, при назначении иммунокорректирующей терапии.

Современная иммунологическая лаборатория имеет возможность провести:

1. Оценку иммунного статуса

2. Диагностику первичных иммунодефицитов

3. Аллергодиагностику

4. Диагностику аутоиммунных, инфекционных, онкологических заболеваний

5. Обеспечить трансплантацию.

Необходимо построение системы медицинских стандартов иммунологического обследования больного. Составляющие стандартизации иммунологического обследования:

1. Стандартизация показаний к лабораторному иммунологическому обследованию

2. Стандартизация определения лабораторных иммунологических показателей

3. Стандартизация интерпретации результатов.

1. Стандартизация показаний к лабораторному иммунологическому обследованию включает:

Цель и задачи обследования

Диагностика

Мониторинг

Назначение иммунокорректирующей терапии

Выбор показателя с позиций доказательной медицины

Определение объема иммунологического обследования.

2. Стандартизация определения лабораторных иммунологических показателей включает:

А) Стандартизация доаналитического этапа

Подготовка больного

Взятие биологического материала

Режим хранения и доставки материала в лабораторию

Регистрация и маркировка образцов

Первичная обработка биоматериала

Банкирование биоматериала

Б) Стандартизация аналитического этапа

Протоколы методов

Стандарты внутреннего контроля качества

Программы внешнего контроля качества

В) Стандартизация постаналитического этапа

Форма представления окончательного результата

Унификация значения нормы

3. Стандартизация интерпретации результатов включает:

Сопоставление результатов с клиническими данными

Сравнение диагностической информативности отдельных показателей

Алгоритмы диагностики

Заключение

Подтверждение диагноза

Определение фазы заболевания

Описание иммунной системы

Рекомендации

Проведение дополнительного обследования

Назначение иммунокорректирующей терапии

Специализированные программы внешней оценки качества