Определение групповой принадлежности. 1 способ – способ стандартных сывороток.Сыворотки готовят из донорской крови
1 способ – способ стандартных сывороток.Сыворотки готовят из донорской крови. У сывороток известна концентрация, срок хранения, серийный номер. Сыворотка представляет собой дефибринизированную плазму. Титры сывороток окрашивают разными красителями:
I – естественный цвет (бесцветная сыворотка);
II – сыворотка синего цвета, на флаконе – 2 полоски по диагонали;
III – сыворотка окрашена красным кралителем, на флаконе – 3 полоски по диагонали;
IV – сыворотка ярко жёлтого цвета, 4 полоски по диагонали.
Если агглютинации нет ни в одной лунке, в крови нет А и В антигенов, значит данная кровь I группы.
Если агглютинация произошла в 1 и 3 лунке, значит в крови есть А-антиген и это кровь II группы.
Если агглютинация произошла с 1 и 2 сывороткой, значит в крови есть В-антиген. Это кровь III группы.
Если агглютинация произошла с 1, 2, 3 сыворотками, в крови есть и А, и В антигены. Это кровь IV группы.
2 способ – способ стандартных эритроцитов.Эритроциты готовятся из донорской крови. Из вены берут 3-4 мл крови, центрифугируют, осадок эритроцитов отмывают в физиологическом растворе. Хранятся эритроциты недолго, поэтому готовятся ex tempori. Для определения берут известные эритроциты и неизвестную сыворотку.
« - » - агглютинации нет;
« + » - агглютинация есть.
IO IIA IIIB
- + + - в сыворотке есть α и β антитела, это I группа
- - + - в сыворотке есть β антитело, это II группа
- + - - в сыворотке есть α антитело, это III группа
3 способ – метод цоликлонов. Цоликлоны –это моноклональные антитела. Эти АТ производят в культуре тканей, в клетках гибридомы.
Цоликлон антиА – аналог α-агглютинина, красного цвета;
Цоликлон антиВ – аналог β-агглютинина синего цвета.
антиА антиВ
- (О) - (О) I
+ (А) - (О) II
- (О) + (В) III
+ (А) + (В) IV
Резус-фактор.Система резус-фактор (Rh) открыта К. Ланштейнером. Данная система состоит из 3 фрагментов гликопротеидной природы: Д, С, Е.
Д – самый сильный фрагмент, является настоящим антигеном, вызывает агглютинацию.
С – неполный антиген, гаптен.
Е – гаптен, отвечает за конглютинацию.
Все фрагменты могут быть доминантными и рецессивными. Существует 8 сочетаний фрагментов:
СДЕ СдЕ
СДе Сде
сДЕ сдЕ
сДе сде
Донор является положительным по Rh, если у него хотя бы один антиген доминантный (сочетания: СДЕ, СДе, сДЕ, сДе, СдЕ, Сде, сдЕ. Донор отрицателен при наличии всех рецессивных генов: сде.
Реципиент – либо положительный, либо отрицательный, определяется по антигену Д. Если он доминантный, реципиент положительный (первая колонка генотипов); если рецессивный – реципиент отрицательный (вторая колонка генотипов).
Резус-принадлежностьопределяется экспресс-способом на чашке Петри с помощью антирезусной сыворотки (лошадиная). Уникальную сыворотку можно приготовить из крови Rh - женщины с IV группой крови, которая была беременна Rh + плодом.
К антиД-сыворотке добавляют эритроциты, ставят в термостат (45ºС) на 7-10 минут. Затем наблюдают за результатом:
· Если агглютинация произошла, фрагмент Д присутствует, кровь резус-положительная;
· Если агглютинации нет, фрагмент Д отсутствует, кровь резус-отрицательная.
Все антигенные системы термолабильны. Чем меньше температура, тем активнее агглютинация. Резус-система – термостабильная система.
Дата добавления: 2014-12-14; просмотров: 1012;