Способ Уварова
Особенность данного способа окраски жгутиков — отсутствие в протраве танина.
Техника окраски.
1. Культуру освежают двух-трехкратными пересевами на свежий агар и выращиванием при 37° в течение 15—16 часов.
2. Для приготовления эмульсии в физиологический раствор, налитый в чистую пробирку в объеме 5 мл, осторожно погружают петлю со свежей культурой для получения слабой эмульсии. Легкими круговыми вращениями пробирки между ладонями эмульсию равномерно смешивают, затем добавляют в нее одну каплю формалина.
3. Для окраски приготовляют:
а) насыщенный водный раствор калийных квасцов;
б) раствор: сульфаниловой кислоты 0,5 г + соляной кислоты 1,5 мл + 100 мл дистиллированной воды;
в) раствор Мюра: насыщенный водный раствор калийных квасцов 25 мл + насыщенный спиртовой раствор генцианвиолета - 5 мл;
г) насыщенный спиртовой раствор основного фуксина. Растворы «а» и «б» смешивают в пропорции 1:2. Растворы «в» и «г» смешивают в пропорции 3:1.
4. Окраска. Пастеровской пипеткой наносят на чистое предметное стекло каплю эмульсии и подсушивают препарат в термостате; на высохший нефиксированный препарат наливают смесь растворов «а» и «б», подогревают над пламенем при слабом отхождении паров 1—2 минуты, смывают водой и слегка высушивают. Затем на препарат наливают смесь красок «в» и «г» (раствор Мюра и насыщенный спиртовой раствор основного фуксина), нагревают препарат 1—2 минуты до слабых паров, обильно промывают и высушивают.
Микроскопическая картина: жгутики — яркого красно-фиолетового или розовато-фиолетового цвета, тела бактерий — густо-фиолетовые.
Дата добавления: 2014-12-06; просмотров: 1048;