НОРМАТИВНЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ ИММУНОФЕНОТИПИРОВАНИЯ КЛЕТОК ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ ЗДОРОВЫХ ЛЮДЕЙ

Методы идентификации Т-клеток

1. Метод розеткообразования – рутинный метод. Может использоваться только как тест оценки адгезивной способности Т-лимфоцитов (CD2-зависимой адгезии).

Рис. 20. Реакция розеткообразования

2. Методы с использованием МКА (иммунофлюоресценции, иммунопероксидазный, проточной цитофлюорометрии). CD3- маркер позволяет подсчитать общее количество Т-лимфоцитов. Количество Т-хелперов определяют по числу CD4+-клеток, ЦТЛ– по CD8+-клеток.

3. Функциональной пробой является постановка реакции бласттрансформации с использованием митогенов ФГА, КонА. Этот тест дает возможность при ненарушенном количестве CD3-лимфоцитов выявить функциональный дефект Т-клеток.

Рис. 21. Выделение лимфоцитов в плотности фиколл - верографина

Рис. 22. CD3+ Т – лимоциты, окрашенные анти-CD3 МКА

4. Функциональное состояние CD4-лимфоцитов тестируют по цитокиновому профилю: Х1 – по секреции гамма-ИФН, Х2 – ИЛ-4.

5. Для определения функциональной активности CD8-лимфоцитов проводят тест цитотоксичности. Клетки-мишени метят радиоактивным изотопом и по количеству высвобождаемого изотопа судят о величине цитотоксической активности CD8-лимфоцитов.