Цветные реакции на аминокислоты и белки
| Название реакции | Условия |
| 1 опыт Биуретовая реакция | На пептидные связи В щелочном р-ре белка между пептидными группами -CO-NH- и ионами меди образуются комплексные соединения. Биуретовую реакцию дают все белки, а также олигопептиды,содержащие не менее 2-х пептидных связей. |
| 2 опыт Ксантопротеиновая реакция | На бензольное кольцо ароматических аминокислот При нагревании ароматических АК с концентрированной азотной кислотой происходит нитрование бензольного кольца, входящего в структуру этих кислот, с образованием нитросоединений желтого цвета, которые в щелочной среде переходят в хиноидные структуры оранжевого цвета. |
| 3 опыт Нингид- риновая реакция | На α-аминогруппы При нагревании с нингидрином α-АК окисляются и распадаются с образованием альдегида, аммиака и угольной кислоты, а нингидрин восстанавливается и конденсируется с другой молекулой нингидрина и NH3 с образованием комплексного соединения синегоцвета – ДИДА (дикетогидриндилиден-дикетогидриндиамин). |
| 4 опыт Реакция Фоля 5 опыт Диазореакция | На серосодержащие аминокислоты Серосодержащие АК (ЦИС и МЕТ) при нагревании в щелочной среде легко отщепляют сульфид натрия (Na2S), который в присутствии ацетата свинца превращается в чёрный осадок сульфида свинца (PbS). На тирозин Тирозин реагирует с диазореактивом, образуя азокраситель красного цвета. |
Ход работы и результаты:
| Опыт | В пробирку вносят: | Изменение окраски |
| 1 | 1 мл р-ра белка + 1 мл 10% р-ра NaOH+2 к. р-ра CuSO4 | |
| 2 | 1 мл р-ра белка + 5 к. конц. HNO3 подогреть на спиртовке до образования осадка. Охладить + 10 к. 30% NaОH | |
| 3 | 7 к. р-ра белка + 7 к. 0,1% р-ра нингидрина | |
| 4 | 7 к. р-ра белка + 7 к. 30% р-ра NaOН +1 к. 5% р-ра (CH3COO)2Pb | |
| 1 мл р-ра белка + 5 к. 1% р-рa сульфониловой к-ты + 3 к. 2% р-ра HCl + 5 к. 5% p-pa NaNO2 + сухого Na2CO3 до изменения окраски |
[1] Глутаматдегидрогеназа очень активна в митохондриях клеток практически всех органов, кроме мышц. Этот фермент - олигомер, состоящий из 6 субъединиц (молекулярная масса 312 кД). Глутаматдегидрогеназа играет важную роль, так как является регуляторным ферментом аминокислотного обмена. Аллостерические ингибиторы глутаматдегидрогеназы (АТФ, ГТФ, НАДH) вызывают диссоциацию фермента и потерю глутаматдегидрогеназной активности. Высокие концентрации АДФ активируют фермент. Таким образом, низкий энергетический уровень в клетках стимулирует разрушение аминокислот и образование α-кетоглутарата, поступающего в ЦТК как энергетический субстрат. Синтез глутаматдегидрогеназы может индуцироваться стероидными гормонами (кортизолом).
Дата добавления: 2015-05-26; просмотров: 1858;