Лекция 8

План лекции.Жидкостная хроматография

Отличие ЖХ от ГХ состоит в следующем:

· Особенности всех видов ЖХ обусловлены наличием жидкой подвижной фазы — элюента.

· Сорбция компонентов из газа и жидкого элюента осуществляется по-разному. В отличие от газа, который выполняет только транспортную функцию, жидкая подвижная фаза - активный элюент. При прохождении через колонку находящиеся в элюенте разделяемые компоненты вытесняют молекулы элюента с поверхностного слоя сорбента.

· Диапазон линейности изотермы сорбции в ЖХ больше.

· Селективность в ЖХ в отличие от ГХ определяется не одним, а двумя факторами - природой элюента и неподвижной фазы. Поэтому, применяя различные элюенты, можно изменять параметры удерживания и селективность хроматографической системы.

· Метод ЖХ применим для разделения более широкого круга веществ, чем метод ГХ.

Возможно использование градиентного и изократического элюирования. Изократическое элюирование заключается в том, что в прцессе хроматографирования состав элюента и скорость его подачи через колонку поддерживаются постоянными. При градиентном элюировании для улучшения селективности анализа указанные параметры хроматографирования в ходе эксперимента изменяются.

В настоящее время применяют высокоэффективную жидкостную хроматографию. Её отличает использование высокодисперсных однородных по размеру сорбентов. Большие скорости разделения достигаются использованием для прокачки элюента насосов высокого давления.

Быстрый массоперенос искомых веществ между сорбентом и элюентом обеспечивает высокую эффективность разделения методом ВЭЖ. Она используется:

1. Для разделения и определения молекулярных форм веществ (адсорбционная и распределительная хроматографии).

2. Для разделения и определения ионов (ионообменная, ионная, ион-парная хроматографии).

3. Для разделения макромолекул (эксклюзионная хроматография).

4. Для разделения биологически активных молекул и оптических изомеров (аффинная и лигандообменная хроматографии).