Препаровка.
Тотальная рентгенографияблоков или срезов мозговой ткани (при необходимости — микрорентгенография). Недостатком этого метода является то, что нельзя исследовать глубоко расположенные участки препарата и получать изображение в одной и той же плоскости.
Коррозиякислотой или щелочью кусочка мозга, артерии которого были заполнены виниловыми смолами или латексом. Этот метод оставляет только сосудистый слепок, связь сосудов с окружающими образованиями полностью разрушается и оценка функционального состояния кровотока той или иной области затрудняется.
Просветление блоков или срезов мозга, сосуды которых были предварительно налиты латексом или коллоидным барием. Все используемые в настоящее время методы просветления являются модификациями классического метода Шпальтегольца. Они очень хорошо выявляют внутримоз-говое разветвление сосудистой сети, хотя отличаются трудоемкостью и продолжительностью. Метод просветления, который был разработан нами вместе с J. Ponlhes и Е. Galy в лаборатории анатомии в Тулузе, состоит из нескольких этапов. После перевязки основных сосудов выбирают участок для исследования и фиксируют в 10% растворе формалина в течение 8 дней. При необходимости производят предварительную рентгенографию. Срезы отбеливают в десятикратном объеме перекиси водорода, промывают 24 ч в проточной воде, а затем в дистиллированной воде в течение суток.
Перекись водорода следует менять часто, особенно на первых этапах отбеливания, длительность которых зависит от блока и толщины срезов.
Второй этап заключается в обычном обезвоживании в спиртах восходящей крепости: кусочки мозга погружают последовательно в 50°, 70°, 85°, 95° и абсолютный спирт на 24 ч в каждый. Перед каждой сменой спирта кусочек тщательно просушивают фильтровальной бумагой.
Далее срезы просветляют в ксилоле; продолжительность пребывания кусочка в растворе до получения хорошей прозрачности варьирует от 72 до 96 ч; ксилол в сосуде должен меняться каждые 24 ч. Затем срез помещают в сосуд с полиэфирной смолой без катализатора. Эту процедуру следует проводить в вакууме во избежание образования в ткани пузырьков воздуха и для создания благоприятных условий равномерному пропитыванию вещества мозга смолой.
Просветленные таким образом срезы можно исследовать и фотографировать непосредственно в сосуде с жидкими смолами или после заливки в них.
Преимущество этого метода просветления заключается в том, что изготовленный таким образом препарат можно исследовать под бинокулярной лупой или под микроскопом, изучая соотношения сосудов с окружающими структурами и ход артерий как на поверхности, так и в глубине сосудистого бассейна определенной области. Недостатком метода является потеря деталей среза при фотографировании.
Дата добавления: 2015-04-29; просмотров: 988;