Выделение чистых культур патогенных клостридий
Исследуемый материал:
| Посев на плотные среды: чашка с кровяным агаром, чашка с бензидиновым агаром, чашка со средой Виллиса-Хоббс, пробирки со средой Вильсон-Блера Инкубация в анаэробных условиях при 37° в течение 1-7 суток. | Посев на жидкие среды для накопления (мясные, казеиновые). Инкубация при 37° в течение от 16 часов до 15 суток. Выросшие культуры, содержащие массу грамположительных палочек, пересевают на плотные среды, как указано. |
Микроскопия и пересев на мясную или казеиновую среду колоний, вызывающих гемолиз, покраснение, опалесценцию или почернение на одной из указанных сред и состоящих из грамположительных палочек, для получения чистых культур и последующего изучения их свойств.
Среда Виллиса-Хоббс : смесь (400 мл бульона Хоттингера + 4,8 грамма агара; 4,8 грамма лактозы и 1,3 мл 1% раствора нейтрального красного) автоклавируют, охлаждают до 55-50 и добавляют 15 мл суспензии яичного желтка и 60 мл стерильного обезжиренного молока.
2. Причины высокой чувствительности строгих анаэробов к кислороду объясняют следующими обстоятельствами:
1. Отсутствием у них каталазы (в присутствии кислорода накап-
ливается перекись водорода, которая и оказывает бактерицидное
действие на анаэробы).
2. В аэробных условиях тормозятся анаэробные энергетические
процессы (пастеровский эффект).
3. Отсутствием у анаэробов систем регуляции окислительно-
восстановительного потенциала. В присутствии кислорода он повы-
шается, анаэробы не могут понизить его до необходимого уровня, и
поэтому их рост подавляется.
З А Н Я Т И Е6
Дата ______________
Тема: Бактериологический метод (3 день). Идентификация чистых культур бактерий. Биохимическая активность бактерий.
Дата добавления: 2015-02-16; просмотров: 1350;