Scenedesmus quadricauda (Turp) Breb

Определение острой и хронической токсичности сточных, поверхностных и подземных вод, донных отложений (водных вытяжек), буровых растворов, водных растворов отдельных веществ и их смесей можно

бихромата калия и серной кислоты (хромовой смесью), затем тщательно водопроводной водой и 3-4 раза дистиллированной водой. Посуду, используемую для культивирования и биотестирования, за исключением мерной, стерилизуют в сушильном шкафу при 160°С в течение 1,5 ч. Не разрешается пользоваться для мытья посуды синтетическими поверхностно-активными веществами и органическими растворителями. Можно пользоваться питьевой содой.

При культивировании периодически обновляют культуру водорослей, пересевая ее на свежую питательную среду не реже одного раза в 10 дней. Для этого в стерильную колбу объемом 250-300 см³ со свежей средой Прата объемом 150 см³ над пламенем спиртовки наливают 15-20 см³ верхнего слоя исходной культуры (содержимое исходной культуры при этом не перемешивают). Начальная плотность клеток в новой колбе составляет примерно 100-150 тыс. кл/см³, что дает светло-зеленую окраску. В случае ослабления интенсивного роста клеток в культуре, к питательной среде добавляют витамин В₁₂.

После посева колбу закрывают стерильной ватно-марлевой пробкой и бумажным колпачком, перемешивают и помещают в люминостат. В процессе культивирования культуру водорослей периодически перемешивают, встряхивая 1 -2 раза в сутки.

При биотестировании используют 3-х суточную культуру водорослей, находящуюся в экспоненциальной фазе роста. Через 3-е суток подсчитывают численность клеток (которая должна составлять примерно 5 млн.кл/см³).

Далее расчетным путем устанавливают, какое количество культуры водорослей необходимо взять, чтобы получить в опытном и контрольном объеме среды Прата необходимую плотность клеток по 30 тыс. кл/см³ (как правило это 0,5-1 см³ культуры водорослей).

Для подсчета количества клеток водорослей используют счетную камеру Горяева (или другую).

Повторность в опыте и контроле трехкратная.

В опытные и контрольные колбы вносят по 0,5 см³ исходной культуры водорослей S. quadricauda в экспоненциальной фазе роста численностью около 5 млн. кл/см³ (при этом численность клеток водорослей в опытных и контрольных колбах будет составлять около 30 тыс. кл/ см³).

После этого колбы закрывают ватно-марлевыми пробками, встряхивают и помещают в люминостат. Затем считают численность клеток ежедневно, тщательно перемешивая содержимое колб, в течение 3-х суток в остром опыте и 7-и суток - в хроническом.

Через 72 ч или 7 суток биотестирование прекращают. В каждой колбе подсчитывают численность клеток водорослей.

Для каждого параллельного определения в опыте и контроле вычисляют среднее арифметическое численности клеток водорослей в 1 см³ .

На основании результатов трех параллельных определений численности клеток водорослей в контроле и опыте находят средние арифметические численности клеток водорослей в контроле (опыте)).

Рассчитывают численность клеток водорослей в опыте в процентах от их численности в контроле. Принимая численность в контроле за 100%, находят увеличение (уменьшение) численности водорослей в опыте в процентах (Р).

Вывод о наличии или отсутствии токсичности анализируемой пробы воды (водной вытяжки), бурового раствора или раствора вещества (смеси веществ) делают на основании величины Р (изменение численности по сравнению с контролем в процентах). Проба воды (водная вытяжка), раствор вещества (смеси веществ) считается токсичной (токсичным), если величина Р составляет 50% и менее.

Лабораторная работа №9. Виды-индикаторы зоопланктона

Зоопланктон представляет собой сообщество беспозвоночных животных, населяющих толщу воды. Изменение условий существования организмов отражается на видовом составе, количественных показателях, соотношении отдельных таксономических групп зоопланктона.

Рисунок 8. Kellicottia longispina ο – 1.25(Rotatoria)

Рисунок 9. Lecane luna οβ – 1.55 (Rotatoria)

Рисунок 10. Keratella quadrata οβ – 1.55(Rotatoria)

Рисунок 11. Brahionus calyciflorus βα – 2.5(Rotatoria)

Рисунок 12. Leptodora kindtii- οβ – 1.65(Cladocera)

Рисунок 13. Moina macrocopa α – 2.75(Cladocera)

Рисунок 14. Daphnia magna αρ- 3.4 (Cladocera)

Задание. Рассмотреть в камере Богорова под бинокуляром виды зоопланктона, имеющие разную степень сапробности. Зарисовать. Указать на особенности биоиндикации вод по зоопланктону.