Общие закономерности серологических реакций
Реакции проявляются при иммунологическом соответствии антигена и антитело в соответствующих оптимальных условиях температуры и кислотности среды.
Иммунные диагностические сыворотки получают от крупных животных, путем многократного заражения или введения токсинов.
К диагностическим антигенам относятся взвеси живых и убитых микроорганизмов или их токсины.
Выявления специфических антител с помощью известного антигена.
Методы очень широко распространены и применяются с большим успехом уже более 100 лет. Но, к сожалению, оценка серологического исследования в ряде случаев представляет определенную трудность.
Во-первых, в большинстве случаев антитела начинают синтезироваться только на 5-7 день болезни, во-вторых – для большинства методов необходимо исследование парных сывороток и наконец, сам иммунный ответ может быть не достаточно напряженным, что очень часто наблюдается у маленьких детей и у пациентов с иммунной депрессией.
Необходимо также учитывать, что реакции не являются абсолютно специфическими ввиду наличия общих антигенов у возбудителей, относящихся к одному и даже разным видам. Специфичность серологических тестов зависит
также от качества диагностикумов, правильности получения, хранения, транспортировки и обработки сыворотки. Нельзя использовать кровь, имеющую бактериальное загрязнение, гемолиз, посторонние примеси и длительно хранящуюся при комнатной температуре.
Для диагностики чаще используются РА, РНГА, РСК, РТГА и РЛ.
Реакция агглютинации. (РА).
При использовании берут 5 мл. крови пациента и получают сыворотку, которую разводят в изотоническом растворе от 1:50 до 1:1600 так как в концентрированном растворе могут быть нормальные антигены у здоровых людей или больных со схожими болезнями и выдерживают в термостате в течение 20 минут для инактивации посторонних белковых примесей.
В качестве антигена используют взвесь известных убитых микроорганизмов (диагностикум) с которыми безопасно работать. Реакцию ставят в пробирках.
Диагностическое значение имеют разведения титра 1:200-1:400 и более. Чем больше разведение, тем реакция более достоверна. Обычно используют, метод парных сывороток, – проводя, идентичную реакцию спустя 5-7 дней и сравнивают, полученные результаты. Титр агглютинации должен повышаться и реакция должна происходить в больших разведениях, чем предыдущая, т.к. происходит накопление антител.
РА используется для лабораторной диагностики многих инфекционных болезней.
Дата добавления: 2015-03-14; просмотров: 652;