Генетические исследования

Определение Х-хроматина проводится в эпителиальных клетках слизистой оболочки рта и влагалища, в ядрах зрелых нейтрофилов. Ядро, содержащее одно хроматиновое тель­це Барра, является хроматин-положительным, а не содержа­щее — хроматин-отрицательным. Хроматин-положительные ядра встречаются при наличии не менее двух Х-хромосом, т.е. при ХХ-хромосомном наборе у здоровых женщин, а хроматин-отрицательные — при нормальном мужском XY-хромосомном

28 Практическая гинекология

комплексе. Таким образом, число телец Барра в каком-нибудь ядре всегда меньше числа Х-хромосом.

Определение Х-хроматина имеет важное значение для диагностики хромосомных аномалий, гермафродитизма, ад-реногенитального синдрома. Так хроматин-положительные ядра встречаются при синдроме Клайнфельтера с различными хромосомными комплексами (XXY, XXY/XY). Иногда ядра имеют 2 и более телец Барра (XXXY/XXXXY). Хроматин-от­рицательные ядра встречаются при синдроме Шерешевского-Тернера с хромосомным набором ХО и некоторых хромосом­ных мозаиках.

При буккальном и вагинальном тесте подсчитывают 100 кле­ток: в клетках с женским генотипом на каждые 5 клеток в одной из них видно одно тельце Барра, с мужским генотипом — на 100 клеток не более одного, содержащего тельце Барра. При опре­делении генотипа по ядрам нейтрофилов (лейкоцитарный тест) в мазках крови подсчитываются 500 нейтрофильных лейкоцитов: для женского генотипа характерно более 6 клеток с тельцами Барра («барабанные палочки»), а при мужском — меньше 4.

Возможно определение генетического пола еще в период внутриутробного развития. Для этого в амниотической жидкос­ти (при амниоцентезе) исследуют свободно плавающие десква-мированные фетальные клетки [29].

Анализ кариотипа основан на подсчете количества хромо­сом. Исследование кариотипа проводится на препаратах мета-фазных хромосом, получаемых из культуры лимфоцитов пери­ферической крови, костного мозга, а также из кожи.

К генетической патологии, обусловленной нарушениями числа Х-хромосом, относятся:

♦ дисгенезия гонад, при которой встречается набор с од­ной половой хромосомой (45,ХО) — «мозаичный на­бор», когда разные клоны клеток содержат разные коли­чественные наборы хромосом, причем в разных клонах могут присутствовать как Х-, так и Y-хромосомы. При­сутствие Y-хромосомы или только ее участка нарушает формирование полноценной половой железы (яични­ка). В неполноценной гонаде развиваются элементы яичка, склонные к озлокачествлению;

Глава 1. Методы обследования гинекологических больных_______________ 29

♦ синдром Клайнфельтера с кариотипом 47XXY, характе­ризующийся мужским фенотипом с недоразвитием на­ружных половых органов, нарушением спермообразова-ния, евнухоидным телосложением;

♦ синдром Шерешевского—Тернера с хромосомным на­бором 45 ХО.

Определение а-фетопротеина (АФП). АФП синтезирует­ся в желточном мешке и печени плода. Концентрация АФП взаимосвязана со сроком беременности и массой плода, что позволяет судить о степени его развития в соответствии с гестационным сроком. В амниотическую жидкость и в кровь беременных АФП попадает из организма плода. Максималь­ное содержание АФП в околоплодных водах (23 мг/л) отме­чается в 14—15 нед., с последующим постепенным снижени­ем до 1 мг/л. В 1-м триместре беременности концентрация АФП в крови матери меньше, чем в околоплодных водах. В последующем проникновение АФП в околоплодные воды уменьшается, а его трансплацентарное поступление в кровь беременной нарастает. В крови беременных увеличение концентрации АПФ происходит с 10 нед. (10—20 нг/мл), до­стигая максимальных величин в 32—34 нед. (до 300 нг/мл); в дальнейшем его уровень в сыворотке крови снижается до 80-90 нг/мл.

Увеличение или понижение содержания АФП является признаком нарушения состояния плода. К повышению уров­ня АФП в сыворотке крови и околоплодных водах (в 2,5 раза и выше) приводят аномалии развития плода: врожденный не­фроз, атрезия двенадцатиперстной кишки, гастрошизис, омфа-лоцеле, менингомиелоцеле, анэнцефалия, spina bifida. Гибель плода сопровождается резким увеличением уровня АФП. Сни­жение концентрации АФП (в 2 и более раза) может быть обус­ловлено синдромом Дауна.

Ультразвуковое исследование, проводящееся в 9—11 недель беременности, позволяет определить толщину воротниковой зоны плода (в норме 3-5 мм). Увеличение этого показателя более 5 мм свидетельствует о дефектах развития, более 7 мм — о высокой степени вероятности генетических дефектов разви­вающегося плода.

30 Практическая гинекология