II. Исследование В-системы иммунитета.

1. Количественное изучение В-лимфоцитов:

§ в реакции розеткообразования с эритроцитами мышей (ЕАРОК);

§ в реакция розеткообразования с бараньими эритроцитами, сенсибилизированными антителами и комплементом (ЕАС-РОК) (N=10-20%);

§ по кластерам дифференцировки CD-19, 20, 22 в непрямой РИФ и ИФА.

2. Определение функциональной активности В-лимфоцитов:

§ РБТ;

§ уровень нормальных антител в реакции агглютинации (РА) с эритроцитами барана и с микробными антигенами (E.coli, стафилококки);

§ содержание сывороточных иммуноглобулинов классов G, М, А методом Манчини(реакция преципитации в геле), непрямым ИФА и РИА(N IgM=109, IgG=233 и IgA=147 МЕ/мл).

Практическое использование методов исследования иммунной системы:

1. Оценка иммунного статуса;

2. Серотипирование бактериальных и вирусных культур;

3. Серодиагностика инфекционных болезней;

4. Выявление иммунопатологических состояний;

5. Определение антигенов тканей человека: групп крови, Rh-фактора, HLA;

6. Выявление в организме человека или во внешней среде любых веществ, обладающих антигенными свойствами (гормонов, ферментов, ядов, лекарств, наркотических средств).

В настоящее время в практической деятельности часто используется рациональный подход к изучению иммунитета, когда исследования распределены на 2 этапа.

Оценка иммунного статуса:

I этап – клиническая долабораторная диагностика иммунопатологических состояний:

§ оценка иммунологического анамнеза (частота инфекционных заболеваний, характер их течения, выраженность температурной реакции, наличие очагов хронической инфекции);

§ оценка общего анализа крови (содержание лейкоцитов, в т.ч. лимфоцитов, моноцитов, сегментоядерных);

§ исследование на бактерио(вирусо-)носительство.

II этап предусматривает применение тестов 2 уровней.

Тесты первого уровня позволяют выявить грубые нарушения функций иммунной системы:

§ процентное содержание и абсолютное количество Т- и В-лимфоцитов;

§ уровень иммуноглобулинов сыворотки крови классов М, G, А, Е;

§ фагоцитарная активность нейтрофилов.

Тесты второго уровня включают углубленное иммунологическое обследование для установления регуляторных нарушений и дисфункций иммунитета:

§ определение субпопуляций Т-лимфоцитов (CD4, CD8), их соотношения;

§ функциональной активности Т- и В-лимфоцитов в РБТ и РТМЛ;

§ цитотоксическая активность лейкоцитов;

§ кожные тесты.

При диагностике различных иммунопатологических состояний перечень диагностических исследований может изменяться. Например, диагностические мероприятия при аллергических заболевания проводятся с учетом механизмов аллергической реакции, направлены на идентификацию причинного аллергена и должны включать:

§ аллергологический анамнез (наличие аллергических реакций на антибиотики, пищевые продукты, пыльцу растений и т. д.);

§ данные клинико-лабораторных исследований (лейкоцитоз, эозинофилия);

§ определение содержания общего и специфических JgE в сыворотке крови при аллергических реакциях I типа;

§ определение содержания аутоантител (антиэритроцитарные, антилейкоцитарные, антитромбоцитарные…) в сыворотке крови при аллергических реакциях II типа;

§ определение содержания комплексов АГ-АТ, циркулирующих в крови или фиксированных на тканях, при аллергических реакциях III типа;

§ проведение кожно-аллергических проб.

Кожно-аллергические пробы:

При постановке кожно-аллергических проб наиболее часто применяют внутрикожное и накожное введение аллергена в область предплечья.

Оценка кожно-аллергических проб:

* «положительная» – при ГНТ через 20-30 минут, при ГЗТ через 24-48 часов на месте введения аллергена возникает гиперемия и образуется папула (выраженность реакции зависит от степени сенсибилизации организма);

* «отрицательная» – уколочная реакция.