Методика посева патологического материала на пита­тельные среды

Необходимость бактериологического исследования определяется характером заболевания, стандартами исследования, потребностями диагностического процесса. Наиболее часто для бактериологического исследования используют: мокроту, кровь, кал, рвотные массы, про­мывные воды, мочу, дуоденальное содержимое, спинномозговую жид­кость и др.

Собранный материал можно посеять на чашку Петри у постели больного (при коклюше и менингококковой инфекции), в пробирку (флаконы) с питательной средой при дифтерии, стафилококковой и стрептококковой инфекциях и т. д.

Мокрота для бактериологического исследования должна соби­раться в утренние часы после полоскания ротоглотки теплой кипяче­ной водой.

Детям грудного и раннего возраста полость рта протирают сте­рильным ватным тампоном, смоченным физиологическим раствором. У детей грудного возраста для получения мокроты необходимо сте­рильным штапелем вызвать рефлекторный кашель надавливанием на корень языка. Мокрота собирается стерильным ватным тампоном, ук­репленным на палочке, которая затем помещается в стерильную про­бирку, закупоривается и направляется в лабораторию. У больных кок­люшем посев можно производить сразу на чашку Петри с питательной средой, которую располагают во время кашля на расстоянии 20-25 см от рта.

Дети старшего возраста мокроту сплевывают в стерильный флакон. На бактериологическое исследование необходимо направлять и лаваж­ную жидкость, получаемую при проведении диагностических и лечеб­ных бронхоскопий.

Кровь для бактериологического исследования забирают из вены с соблюдением требований асептики в количестве 10-15 мл. Набрав не­обходимое количество крови в шприц, медицинская сестра отсоеди­няет иглу от конуса шприца стерильным пинцетом, а конус обжигает над пламенем. Кровь из шприца помещается в стерильные флаконы с питательной средой, заранее полученные из бактериологической лабо­ратории. Пе­ред вливанием крови во флакон его горлышко должно быть обожжено пламенем. Соотношение крови и среды должно быть 1:10. Для исклю­чения случайного загрязнения крови при манипуляции рекомендуют производить посев крови не в один, а в несколько флако­нов.

Рвотные массы для бактериологического исследования собирают в чистую банку с широким горлом и закрывают полиэтиленом или во­щеной бумагой. Промывные воды (первые порции) также собирают в стерильные, плотно закрывающуюся посуду.

Кал. Забор кала для бактериологического исследования можно провести непосредственно из прямой кишки или взять на анализ часть испражнений. Для исследования стерильным шпателем или ложечкой отбирают каловые массы, содержащие слизь, гной. Кал, содержащий кровь, на исследование не отбирают, так как в крови содержатся бакте­риостатические вещества, сдерживающие рост микроорганизмов на питательных средах. Материал сразу помещают в стерильную посуду и направляют в лабораторию.

У больных ОКИ забор материала осуществляется до начала этио­тропной терапии. Забор материала проводится в стерильные пробирки с глицериновой смесью или физиологическим раствором. Консервант заранее наливают в пробирки по 0,5 мл, при этом количество испраж­нений, вносимых в пробирку, не должно превышать 1/3 объема консер­ванта. Срок доставки в лабораторию не позже 2-х часов после забора материала. При невозможности своевременной доставки материал по­мещается в холодильник и направляется на исследование не позднее 12 часов после забора. Пробы кала для исследований на иерсинии, кампи­лобактерии необходимо обязательно хранить в морозильной камере.

Кал из прямой кишки на исследование берут при помощи стериль­ной металлической петли. Петлю вводят в задний проход и помещают в стерильную пробирку, которую закрывают стерильной пробкой и отправляют в лабораторию на исследование.

Моча. Перед забором мочи для бактериологического исследования проводят туалет наружных половых органов кипяченой водой, мылом. Собирают сред­нюю порцию мочи (15-25 мл) во время мочеиспускания.

Слизистые оболочки носа и зева. Мазки со слизистых оболочек носа и зева берут утром, натощак, до приема лекарственных препара­тов. Перед манипуляцией нельзя полоскать ротоглотку.

Для забора материала используют стерильный ватный тампон, ук­репленный на палочке, который находится в стерильной пробирке. Тампон вводят в полость носа. Слизь снимают легким вращательным движением. Тампон помещают в стерильную пробирку, плотно закры­вают стерильной пробкой и направляют в лабораторию на исследова­ние.

При подозрении на менингококковую инфекцию посев взятой слизи проводится у постели больного в чашки Петри с плотной питательной средой (сывороточный агар, среда с ристомицином). Мазки с поверх­ности зева, миндалин, задней стенки глотки берут отдельными тампо­нами.

Материал для исследования лучше брать до начала антибактери­альной терапии. При посеве материала на чашку Петри рукой, удержи­вающей ее, приподнимают крышку настолько, чтобы прошла петля или тампон и по поверхности агара (стараясь не царапать питательную среду) парал­лельными штрихами, в верхней части густо, а затем штри­хами на рас­стоянии 0,5 см распределяют материал для посева. Петлю (тампон) быстро вынимают и опускают в дезраствор. Чашку Петри тотчас за­крывают и помещают в термостат вверх дом на сутки, обяза­тельно подписав ее. В бактериологическую лабораторию материал должен сопровождаться направлением с указанием фамилии, имени, отчества, даты забора материала, указанием предварительного диаг­ноза.

Бактериологическое исследование на BL (возбудитель дифтерии) производится при диаг­ностике дифтерии, при ангинах, грибковых по­ражениях и др. При по­дозрении на дифтерию материал для исследова­ния у больного берется как из ротоглотки, из носа и других мест в за­висимости от локализации патологического процесса.

Для взятия мазка пользуются специальным стерильным ватным тампоном, укрепленным на конце деревянной или металлической па­лочки и заключенном в стерильную пробирку. Такие тампоны изготав­ливаются в бактериологической лаборатории.

Техника взятия мазка. Больной широко открывает рот, одной рукой врач шпателем надавливает на корень языка книзу, другой рукой из­влекает из про­бирки тампон и осторожно, не прикасаясь к слизистой щек и языку, подводит его к миндалине. Затем делается мазок по по­верхности мин­далины в области налета, осторожно извлекают тампон из полости рта и погружают его в пробирку, избегая соприкосновения тампона с ее наружной поверхностью.

Мазок из носа также берется тампоном, который вводят в ноздрю, затем извлекают оттуда и погружают в пробирку. Предварительно горлышко пробирки проносят над огнем. К пробирке прикрепляют направление, на котором записывают фамилию, имя, отчество, возраст больного, дату взятия мазка и цель исследования. Затем пробирку от­правляют в лабораторию, где после окраски синькой Леффлера прово­дится бактериоскопия. Результат исследования может быть получен уже через 1 час. Выявление палочек, по внешним данным похожим на дифтерийные, может служить в сочетании с клиникой ориентиром для предварительной диагностики дифтерии и решения вопроса о введении противодифтерийной антитоксической сыворотки.

Предварительные результаты бактериологического исследования получают через 24 часа, а окончательного - через 48 часов. Положи­тельные результаты исследования являются основанием для оконча­тельной диагностики дифтерии и проведения в полном объеме всех лечебных и профилактических мероприятий.