Молекулярная диагностика
Успехи современной медицины и сельского хозяйства часто зависят от того, удается ли обнаруживать специфические вирусы, бактерии, грибы, паразитические микроорганизмы, белки и низкомолекулярные соединения в организме человека или животных, в растениях, воде или почве. Например, профилактику и лечение любого инфекционного заболевания значительно облегчает ранняя и точная идентификация вызвавшего его патогенного микроорганизма. Для проведения многих диагностических процедур необходимо сначала вырастить культуру потенциально патогенного микроорганизма и лишь затем проанализировать спектр его физиологических свойств. Хотя подобные тесты весьма эффективны и обладают достаточно высокой специфичностью, они часто занимают много времени и являются дорогостоящими. Это относится к идентификации и бактерий, и паразитических микроорганизмов (табл.1). Кроме того, весьма ограничена возможность выявления тех патогенных микроорганизмов, которые плохо растут в культуре либо вообще не поддаются культивированию. В качестве примера можно привести облигатных внутриклеточных паразитов Chlamydia trachomatis, которые вызывают хламидиоз, болезнь, передающуюся половым путем и распространенную в Северной Америке и Европе. Хламидиоз трудно диагностировать, поскольку для этого необходима перевиваемая культура клеток. При этом часто получают ложноотрицательные результаты (т. е. ошибочно диагностируют отсутствие микроорганизма), в результате чего не проводится адекватное лечение. Безусловно, если для выявления микроорганизма необходимо выращивать его в культуре, то рутинной может стать идентификация лишь нескольких из всех известных патогенных микроорганизмов. Чтобы устранить это принципиальное ограничение, были разработаны методы молекулярной диагностики, в основе которых лежат иммунологические подходы или методы обнаружения специфической ДНК.
Таашца 1. Сравнение некоторых методов диагностики инфекционных заболеваний, вызванных паразитическими микроорганизмами
| Метод | Преимущества | Недостатки |
| Mикроскопическое исследование | Простота Прямое выявление паразитических микроорганизмов Возможность разграничения микроорганизмов по морфологическим признакам | Трудоемкость, длительность Низкая чувствительность Невозможность азграничения сходных микроорганизмов Необходимость высокой квалификации для интерпретации результатов |
| Культивирование in vitro u иммунизация мышей | Обнаружение только жизнеспособных паразитических микроорганизмов Возможность определения вирулентности и инфекционности | Длительность анализа, высокая стоимость. Разные породы животных дают разные ответы Потеря.жизнеспособности в организме животного Использование животных |
| Определение антител в сыворотке | Простота, непродолжительность анализа Возможность автоматизации Возможность тестирования большого числа образцов | Не всегда специфичен Невозможность разграничения острой и латентной форм инфекции |
| Гибридизация и ПЦР | Быстрота, высокие чувствительность и специфичность Прямое обнаружение паразитических микроорганизмов Возможность разграничения разных видов Независимость результатов от предыдущих инфекций Не требуют жизнеспособности паразитов Возможность автоматизации | Высокая стоимость анализов, многоэтапность Невозможность различить живые и мертвые микроорганизмы Возможность получения ложноположительных и ложноотрицательных результатов |
Любой метод выявления патогенных микроорганизмов должен быть достаточно простым и обладать высокой специфичностью и чувствительностью. Специфичный диагностический тест должен давать положительный ответ только на микроорганизм- или молекулу-мишень, чувствительный — обнаруживать очень малые количества такой мишени даже на фоне других микроорганизмов или молекул, загрязняющих образец. Простота метода подразумевает, что он является достаточно продуктивным, эффективным и недорогим для рутинного применения.
Дата добавления: 2016-05-11; просмотров: 603;